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怎么調整人ELISA試劑盒試驗的對策

發布時間:2020-03-02瀏覽次數:4328返回列表

ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的使用,但操作中的各個環節對試驗的檢測作用影響較大,人ELISA試劑盒如不留意,有或許導致顯色不全、花板等結果。


一.下面將操作中各個環節常出現問題解決辦法總結于下:

1.挑選試劑: 挑選質量優良的檢測試劑,嚴厲按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

2.標本收集與保存: 防止使用肉眼可見的溶血標本、高脂標本和混濁標本;2-8℃下,標本可放置24-48小時,長時間保存需放置-20℃下。請防止重復凍融。

二.人ELISA試劑盒具體請參照:

1.試劑使用中的預備工作及留意事項

2.試劑盒中會有提示,一般需要預備的有: 洗滌液;用前制造;有的試劑盒會標明,配好的4度下一般可以放一個月;假如沒有標明,盡量用新鮮的,不要多制造。顯色液(有A液和B液的),用前15分鐘制造

3.規范品:有的試劑盒中規范品是現已制造好的,4度保存;有的是要現制造的;按照說明書操作,濃縮生物素結合的二抗和HRP:假如需要制造,試劑盒沒注明配好可以保存多久的話,盡量現配現用(用前15分鐘制造)

4.原則是:試劑盒上沒有指出制造物的貯藏方法的話,應該現配現用;不要怕麻煩;還有小瓶的管子開蓋前要離心,以免蓋子上粘連今后總量不行

5.加 樣:室溫溫育的試劑,特別是溫育時間比較短的試驗操作的試劑,加樣對數據的影響比較大,特別要留意加樣問題

三.欠好的操作原因:

1.不會正確使用加樣器

2.血清或血漿標本分離欠好即進行加樣

3.人ELISA試劑盒手工操作中,加樣板過多形成加樣後放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)

4.加完標本再加酶試劑時酶濺起孔外

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